밀 자급률 제고를 위해 “밀산업 육성법”이 제정되었고, 정부에서는 2030년까지 10% 자급률 달성을 목표로 설정하였다. 밀산업 육성법은 가격 경쟁력 제고, 생산 기반 확충, 국산밀 유통 차별화, 안정적 소비 시장 확보 및 품질 고급화 등의 추진 방향을 포함하고 있다(Jung et al. 2020). 국산밀 품질 경쟁력 강화를 위해서는 체계적인 국산밀 종자 보급 및 품질 검사 체계 정비와 품질 관리 제고를 위한 주산지 거점 건조⋅저장 시설 확충 등 여러 측면을 고려해야 하지만, 양질의 종자 생산, 공급 및 순도 관리 강화를 위한 시스템이 구축되어야 한다(Bae & Park 2020, Jung et al. 2020).

주요 밀 생산국인 미국, 호주와 캐나다 등은 종자의 순도 유지를 위해 외관 검사를 통하여 이물 또는 협잡물 혼입 정도를 평가하고, 과산화효소, KOH 및 NaOH 등을 화학처리를 이용하여 종자의 순도를 검정한다(Lee et al. 2004, Salem et al. 2018). 밀 종자의 색, 크기 및 무게와 관련된 유전자에 대한 연구가 활발해지면서 분자 표지를 활용한 변이와 다양성 구분이 가능해지고 있다. 종피색 관련해서 R 유전자와 Polyphenol oxidase (PPO)가 알려져 있으며(Sun et al. 2005, He et al. 2007, Himi et al. 2011, Si et al, 2012, Wang et al. 2016, Morris 2018), 종실 크기 관련 14개(TaCwi-A1, TaSuS2-2A, TaSuS-2B, TaTGW6-A1, TaGS5, TaCKX-D1, TaCwi-4A, TaCwi-5A, TaTPP, TaGW2-6A, TaGW2-6B, TaSus1, TaGASR-A1과 TaGs3-D1) 유전자가 보고되었으며(Sehgal et al. 2019), TaCWI-4A, TaCWI-5D, TaGS1a, TaGW2-6A와 TaSus2-2B는 국내 밀 품종의 종자 특성 변이와 상관 있는 것으로 나타났다(Kim et al. 2020). 최근 들어 영상 이미지 분석에 빅데이터 분석이 적용되면서 개별 종자의 특성 분석이 가능해졌기 때문에 영상 이미지 분석을 활용하여 효과적인 종자 순도 분석이 가능하다(Winn et al. 2021).

본 연구는 신속하고 정확한 국산밀 품종 순도 검정 체계 기반 구축을 위하여 국산밀 50개 품종의 화학적 외관 검사와 관련 분자 표지인자 및 영상 이미지를 분석하였다.

공시 재료

본 연구에는 국내 밀 50품종을 이용하였으며, 공시 재료는 완전 임의 배치법으로 시험 포장에서 3반복으로 0.25 m×4 m×3열 조건에서 재배하였다. 공시재료는 국립식량과학원 전작 포장인 전북 완주에서 2020년 10월 25일에 파종하여 다음 해 6월 20일에 수확하였으며, 농촌진흥청 표준재배법(RDA 2012)에 준하여 재배하였다. 콤파인으로 수확하고 정선하여 수분 함량이 14%가 되도록 상온에서 건조 한 다음, 10℃ 저온실에 보관하였다.

화학적 외관 검사

종피색 검정에는 NaOH, Ninhydrin와 L-DOPA (L-dihydroxy- phenylalanine) 시약을 이용하였다. NaOH를 이용한 평가는 Ram et al. (2002)의 방법에 따라 실온에서 5% NaOH 용액에 1시간 침지 시켰다. Ninhydrin을 이용한 평가는 Salem et al. (2018)의 방법에 따라 1.5% FeSO₄에 24시간 침지시킨 후 0.3% Ninhydrin 용액을 10 ml 적신 두 겹의 여과지가 담긴 페트리 접시에 담아 실온에서 24시간 동안 차광시켜 보관 후 평가하였다. L-DOPA를 이용한 평가는 Anderson & Morris (2001)의 방법에 따라 종자 5립을 2 ml tube에 0.05 M MOPS (pH 6.5)와 0.01M L-DOPA 시약을 1.5 ml 첨가하여 한 시간 동안 회전시킨 뒤 착색 정도를 평가하였다.

Genomic DNA 추출 및 PCR 분석

온실에서 3주간 생육 시켜 자란 식물체의 3엽을 채취하여 액체 질소로 급속 냉동 시킨 후 유발을 이용하여 미세 분말로 분쇄한 뒤 -70°C에 보관하였다. Genomic DNA는 잎 분말(100 mg)로부터 식물용 genomic DNA 분리시약(Solgent, Korea)을 이용하여 추출하였다. 추출한 genomic DNA는 Nanodrop 1000 spectrophotometer (Thermo Scientific, Wilmington, USA)를 사용하여 정량하였고, -20°C에 보관하여 사용하였다. 종피색에 관련된 R 유전자 검정은 Wang et al. (2016)의 방법에 준하여 실시하였으며, PPO 유전자 검정은 Ppo-A1, Ppo-B1과 Ppo-D1 유전자에 대해서 각각 Sun et al. (2005), Si et al. (2012)과 He et al. (2007)의 방법에 준하여 분석하였다. 종실 크기 관련 유전자는 TaCWI-4A, TaCWI-5D, TaGS1a, TaGW2-6A와 TaSus2-2B를 분석하였으며, 각각 Jiang et al. (2015), Guo et al. (2013), Su et al. (2011)와 Jiang et al. (2010)의 방법에 준하여 분석하였다. PCR 증폭은 Veriti® Dx 96-Well Thermal Cycler (Applied Biosystem, USA)을 사용하였고, PCR 산물은 EtBr (0.5 ㎍/㎖)이 포함된 1% agarose gel에서 135 V로 30분 동안 전기영동 한 후 UV transilluminator에서 확인하였다.

영상 이미지 분석

밀 종자의 이미지 수집을 위해 암막 처리된 챔버 내의 digital camera α6000 (Sony Co., Tokyo, Japan)에 30 mm MACRO 렌즈와 무선 리모컨을 설치해 100개 종자를 ImageJ (Abràmoff et al. 2004) 프로그램을 이용하여 분석하였다. 조사 항목은 종자 길이(GL, Grain Length), 종자 폭(GW, Grain Width), 종자 길이와 종자 폭의 비율(AR, Aspect Ratio), 종자 둘레(GP, Grain Perimeter), 종자 면적(GA, Grain Area)과 종자의 원형률(GC, Grain Circularity)을 측정하였다(Fig. 1).

Fig. 1. Description of wheat kernel. Grain perimeter (GP); The length of the outside boundary of the selection. Grain length (GL); The longest length of the grain. Grain width (GW); The shortest length of the grain. Grain area (GA); Area of selection in square pixels or in calibrated square units. Aspect ratio (AR); The aspect ratio of the particle’s fitted ellipse. Grain circularity (GC); The degree of roundness of a circular hole.

통계 분석

종자의 화학적 외관 검사와 영상 이미지 분석은 3회 이상 이상의 반복을 두어 실시하였으며, LSD (Fisher's least significant difference procedure) 및 DMRT (Ducan' s multiple range test)와 ANOVA (Analysis of variance)를 분석하였고, 상관 관계는 Pearson’s correlation coefficients를 이용하여 p<0.05 수준에서 검정하였다. 군집분석은 R 통계프로그램의 함수인 “prcomp”으로 분석을 수행하였으며, 군집수는 NbClust Package 의 휴버트 지수(Hubert index)와 D index를 이용하였으며, 이미지화는 “autoplot” 함수를 사용하였다(The R Project for Statistical Computing, R version 3.4.4 from https://www.r-project.org).

화학적 외관 검사

국산밀 50개 품종에 대해서 3가지 화학적 외관 검사 결과 착색된 색에 따라서 백립계와 적립계로 구별이 가능하였다(Fig. 2). NaOH 처리 결과, 백립계로 알려진 13개 품종(금강, 다분, 백강, 백중, 백찰, 연백, 적중, 조경, 중모2003, 중모2004, 중모2008, 중모2012, 한백)은 밝은 노란색을 나타내었고, 적립계로 알려진 37개 품종(경광, 고분, 고소, 그루, 남해, 다중, 다홍, 밀성, 새금강, 새올, 서둔, 수강, 수안, 신미찰, 신미찰 1호, 안백, 알찬, 영광, 올, 올그루, 우리, 은파, 장광, 조광, 조농, 조아, 조은, 조중, 조품, 조한, 진품, 진풍, 청계, 탑동, 태중, 호중, 황금알)은 붉은색으로 착색되었다(Table 1, Fig. 2A). 적립계 밀은 NaOH에 노출되면 붉은색으로 변하는 색소인 프로안토시아닌이 존재하여 붉은색으로 착색이 되고, 백립계 밀은 배유 또는 종피에 존재하는 카로티노이드 색소가 노란색으로 착색되어 구별이 가능하다(Ram et al. 2002, Ramani et al. 2016). NaOH를 이용한 종피색 검정은 종자 수확시 먼지나 토양을 포함한 불순물과 수분 함량 및 재배 환경에 영향을 받아 종피색 구별이 어려울 경우 국내에서도 흔하게 이용을 하고 있은 방법이지만 적립계 품종간의 색택의 차이는 구별이 어렵다. 백립계와 적립계를 구별에 KOH를 이용하기도 하는데 NaOH와 비슷한 기작이며 결과도 같기 때문에 두가지 시약 중에 편한 것을 이용하면 된다(Shin et al. 2013, Salem et al. 2018).

Table 1

Classification of Korean wheat cultivars based on NaOH, Ninhydrin and L-DOPA assays.

Chemical	Color	No	Cultivar
NaOH	Red	37	Alchan, Anbaek, Chokwang, Chunggye, Dahong, Dajoong, Eunpa, Geuru, Gobun, Goso. Hojoong, Hwangkeumal, Jangkwang, Jinpoom, Jinpoong, Joa, Joeun, Johan, Jojoong, Jonong, Jopum, Kyungkwang, Milsung, Namhae, Ol, Olgeuru, Saekeumkang, Saeol, Seodun, Shinmichal, Shinmichal1, Suan, Sukang, Taejoong, Tapdong, Uri, Yungkwang
	White	13	Baekchal, Baekjoong, Baekkang, Dabun, Hanbaek, Jeokjoong, Jokyung, Joongmo2003, Joongmo2004, Joongmo2008, Joongmo2012, Keumkang, Younbaek
Ninhydrin	Light violet	37	Alchan, Anbaek, Chokwang, Chunggye, Dahong, Dajoong, Eunpa, Geuru, Gobun, Goso. Hojoong, Hwangkeumal, Jangkwang, Jinpoom, Jinpoong, Joa, Joeun, Johan, Jojoong, Jonong, Jopum, Kyungkwang, Milsung, Namhae, Ol, Olgeuru, Saekeumkang, Saeol, Seodun, Shinmichal, Shinmichal1, Suan, Sukang, Taejoong, Tapdong, Uri, Yungkwang
	Dark violet	13	Baekchal, Baekjoong, Baekkang, Dabun, Hanbaek, Jeokjoong, Jokyung, Joongmo2003, Joongmo2004, Joongmo2008, Joongmo2012, Keumkang, Younbaek
L-DOPA	Black	24	Anbaek, Baekchal, Baekkang, Dajoong, Eunpa, Geuru, Gobun, Hanbaek, Hwangkeumal, Joa, Joeun, Johan, Jojoong, Jokyung, Jonong, Joongmo2003, Joongmo2008, Keumkang, Kyungkwang, Ol, Saekeumkang, Suan, Taejoong, Tapdong
	No change	26	Alchan, Baekjoong, Chokwang, Chunggye, Dabun, Dahong, Goso, Hojoong, Jangkwang, Jeokjoong, Jinpoom, Jinpoong, Joongmo2004, Joongmo2012, Jopum, Milsung, Namhae, Olgeuru, Saeol, Seodun, Shinmichal, Shinmichal1, Sukang, Uri, Younbaek, Yungkwang

Fig. 2. Grain color reaction of Korean wheat cultivars to the chemical tests. The result of the 5M NaOH assay (A; left: red, right: white). The result of the ninhydrin assay (B; left: dark violet, right: light violet). The result of the red wheat L-DOPA assay (C; left: black, right: no color change).

종실의 유리 아미노기에 반응하여 자주색의 복합 물질을 형성하는 Ninhydrin을 처리한 결과(Fig. 2B), 백립계 13개 품종은 밝은 자주색을 나타내었고, 적립계 37개 품종은 진한 자주색으로 착색되었다. 아프리카 북부의 리비아 밀 품종에서도 밝은 자주색으로 착색된 품종이 백립계였으며(Salem et al. 2018), 국내 품종에서도 NaOH와 Ninhydrin처리에 따른 착색 정도가 차이가 없었기 때문에 평가방법이 간단한 NaOH 처리 방법이 Ninhydrin처리 방법을 대체할 수 있을 것으로 생각한다. 밀가루 색은 가공 제품의 색택에 영향을 주고, 소비자들은 밝은 색택을 지닌 제품을 선호하는데 이러한 색택은 PPO 활성과 밀접하게 관련이 있다(Miskelly 1984, Hatcher & Symons 2000). PPO는 호분층에 존재하고 미성숙 종실보다는 성숙된 종실에서 높게 나타나는데, PPO 활성 차이는 품종 고유 특성으로 알려져 있다(Park et al. 1997, Anderson & Morris 2001). 종실의 PPO 활성 측정 기질로는 phenol, L-tyrosine, catechol, methylcatechol, L-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA)과 caffeic acid이 사용되는데 이중에서 L-DOPA와 catechol이 가장 높은 활성을 보이고 평가가 쉬운 L-DOPA assay가 평가에 많이 이용된다(Anderson & Morris 2001, Morris 2018). 국내 품종에 대한 종실의 PPO 활성은 회분과 단백질 함량이 낮을수록 낮은 경향을 나타내었으며, 총 폴리페놀 함량과 철 함량과 정의 상관을 나타내었으며, 종실의 PPO 활성이 높은 품종일수록 국수 면대의 저장 기간 중에 면대 색이 어둡고 쉽게 변색되는 것으로 나타났다(Kang et al. 2011). L-DOPA assay 결과(Fig. 2B), 24개 품종(경광, 고분, 그루, 금강, 다중, 백강, 백찰, 새금강, 수안, 안백, 올, 은파, 조경, 조농, 조아, 조은, 조중, 조한, 중모2003, 중모2008, 탑동, 태중, 한백, 황금알)은 짙은 검정색으로 나타났고, 26개 품종(고소, 남해, 다분, 다홍, 밀성, 백중, 새올, 서둔, 수강, 신미찰, 신미찰 1호, 알찬, 연백, 영광, 올그루, 우리, 장광, 적중, 조광, 조품, 중모2004, 중모2012, 진품, 진풍, 청계, 호중)은 착색되지 않았다.

종실 특성 관련 유전자 분석

종피색과 관련된 R유전자에 대한 평가를 위해 Tamyb-10에 대한 검정을 실시하였는데, Tamyb-10은 안토시아닌 생합성 유전자를 활성화하여 종피색의 적색 정도를 조절하며, 3번 염색체 장완에 위치하고 종피색이 수발아 저항성과 관련성이 높은 것으로 알려져 있다(Lin et al. 2016, Wang et al. 2016). 국내 품종의 Tamyb-10 분석 결과(Table 2, Fig. 3), Tamyb-A1유전자형은 Myb-A1, A2, A3를 모두 종합하여 평가하였는데, 국내 밀 품종에서는 3가지 유형이 나타났고, a type은 Myb-A1, A2, A3의 조성이 (+ + +)와 (- + +)였고, b type은 (+ - +)를 나타내었다(Fig. 3A). 백립계 13개 품종은 Tamyb-A1a/Tamyb-B1a/Tamyb-D1a로 나타났으며, 이러한 결과는 중국의 백립계 품종을 분석한 결과와 일치하였고(Wang et al. 2016), NaOH와 Ninhydrin처리에서도 같은 착색을 나타내었다. 적립계 품종은 5가지 유전자형을 나타내었는데, Tamyb-A1a/Tamyb-B1b/Tamyb-D1a를 지닌 품종은 9개 (고분, 다중, 새금강, 은파, 조은, 진품, 태중, 호중, 황금알)였고, Tamyb-A1a/Tamyb-B1b/Tamyb-D1b의 조성을 지닌 품종은 서둔이 유일 했으며, Tamyb-A1b/Tamyb-B1a/Tamyb-D1a를 지닌 품종은 10개(고소, 밀성, 새올, 수강, 신미찰, 올그루, 조농, 조아, 조중, 조한)였으며, Tamyb-A1b/Tamyb-B1b/Tamyb-D1a을 지닌 품종은 13개(경광, 그루, 남해, 다홍, 수안, 신미찰 1호, 안백, 영광, 우리, 장광, 조품, 진풍, 청계)였고, Tamyb-A1b/ Tamyb-B1b/Tamyb-D1b를 지닌 품종은 4개(알찬, 올, 조광과 탑동)로 나타났다. Tamyb-A1a/Tamyb-B1a/Tamyb-D1a조성을 지닌 백립계 품종은 NaOH와 Ninhydrin를 이용한 구분에서도 같은 특성을 나타내었지만, 중국과 일본의 적립계 품종에서는 Tamyb-A1b/ Tamyb-B1b/Tamyb-D1b (bbb) 조성이 가장 진한 적색을 나타내었고, bba > bab > abb > baa > aba > aab > aaa 순으로 적색 정도가 연하게 되는 것으로 나타났다(Himi et al. 2011, Wang et al. 2016). 적립계는 백립계에 비하여 수발아 저항성이 높으며, 중국의 적립계 품종중에서 Tamyb10-D1b를 지닌 품종의 수발아 저항성이 더 높은 것으로 나타났다(Wang et al. 2016). 국내에서도 적립계 밀 품종의 수발아저항성은 백립계 품종에 비하여 높았지만(Kim et al. 2012b), 본 연구에서는 국내 적립계 품종간의 종실 색택의 차이를 구별하기는 어려웠다. 국내 품종의 종실, 통밀가루 및 밀가루 색택의 차이가 종피색 보다는 단백질, 회분 및 철함량과 PPO 활성과 상관이 높은 것으로 알려져 있으며(Kang et al. 2014), 중국이나 일본 품종에서는 Tamyb-1의 모든 유전자형이 나타났고 적립계 품종에서 구분 가능한 다양한 색택이 나타났지만, 국내 품종에서는 5가지 유전자형만 확인되었고, 적립계 품종간 색택의 차이가 명확하지 않기 때문에 재배환경 및 종실 경⋅연질과 단백질 함량이 미치는 영향에 대한 추가적인 연구와 계통이나 재래종을 포함한 국내 자원에 대한 연구가 필요하다.

Table 2

Allelic variations of Tamby10, Ppo-1, TaCWI-4A, TaGW2-6A and TaSus2-2B in 50 Korean wheat cultivars.

No	Cultivar	Tamby10			Ppo-1			TaCWI-4A	TaGW2-6A	TaSus2-2B
		A1	B1	D1	A1	B1	D1
1	Alchan	b	b	b	b	a	a	C	A	H
2	Anbaek	b	b	a	a	a	a	C	A	H
3	Baekchal	a	a	a	a	a	a	C	A	H
4	Baekjoong	a	a	a	b	a	a	C	A	L
5	Baekkang	a	a	a	a	b	a	C	G	L
6	Chokwang	b	b	b	b	a	b	C	A	H
7	Chunggye	b	b	a	b	a	a	C	A	H
8	Dabun	a	a	a	b	a	a	C	G	H
9	Dahong	b	b	a	b	a	a	C	G	H
10	Dajoong	a	b	a	a	a	a	C	A	H
11	Eunpa	a	b	a	a	b	a	C	A	H
12	Geuru	b	b	a	a	a	b	C	G	H
13	Gobun	a	b	a	a	a	a	C	A	H
14	Goso	b	a	a	b	a	a	T	A	H
15	Hanbaek	a	a	a	b	a	b	C	G	L
16	Hojoong	a	b	a	b	a	a	C	A	H
17	Hwangkeumal	a	b	a	a	b	a	C	G	L
18	Jangkwang	b	b	a	b	a	a	C	G	H
19	Jeokjoong	a	a	a	b	b	a	C	A	L
20	Jinpoom	a	b	a	b	a	a	C	A	H
21	Jinpoong	b	b	a	b	a	a	C	G	H
22	Joa	b	a	a	b	a	a	T	A	H
23	Joeun	a	b	a	a	b	a	C	A	L
24	Johan	b	a	a	a	b	b	C	A	H
25	Jojoong	b	a	a	b	a	a	C	A	H
26	Jokyung	a	a	a	a	b	a	C	G	L
27	Jonong	b	a	a	a	a	b	C	A	H
28	Joongmo2003	a	a	a	a	b	a	C	A	H
29	Joongmo2004	a	a	a	a	b	a	C	G	H
30	Joongmo2008	a	a	a	a	b	a	C	A	H
31	Joongmo2012	a	a	a	b	a	a	C	G	H
32	Jopum	b	b	a	b	a	a	C	A	H
33	Keumkang	a	a	a	a	b	a	C	G	H
34	Kyungkwang	b	b	a	a	a	a	C	G	H
35	Milsung	b	a	a	b	a	a	C	A	H
36	Namhae	b	b	a	b	a	a	T	A	H
37	Ol	b	b	b	a	a	a	T	A	H
38	Olgeuru	b	a	a	b	a	a	T	A	H
39	Saekeumkang	a	b	a	a	b	a	C	G	H
40	Saeol	b	a	a	b	a	a	C	A	H
41	Seodun	a	b	b	b	a	a	C	A	H
42	Shinmichal	b	a	a	b	a	a	T	A	H
43	Shinmichal1	b	b	a	b	a	a	T	A	H
44	Suan	b	b	a	a	a	a	C	A	H
45	Sukang	b	a	a	b	a	a	C	G	H
46	Taejoong	a	b	a	a	b	a	T	G	L
47	Tapdong	b	b	b	a	a	a	C	A	H
48	Uri	b	b	a	b	a	a	C	A	H
49	Younbaek	a	a	a	b	a	a	C	G	L
50	Yungkwang	b	b	a	b	a	a	C	G	H

Fig. 3. Amplification profiles of alleles at Tamyb10-A (A), Tamyb10-B (B) and Tamyb10-D (C) of Korean wheat cultivars. M, Size marker; 1, Eunpa; 2, Hojoong; 3, Goso; 4, Joa; 5, Uri; 6, Tapdong; 7, Alchan; 8, Baekjoong; 9, Hanbaek; 10, Jokyung; 11, Hwangkeumal; 12, Seodun.

PPO 유전자중에서 Ppo-1 유전자는 2AL, 2BS과 2DL에 위치하고 있으며, Ppo-2보다 높은 PPO 활성을 나타내는 것으로 알려져 있다(He et al. 2007, Si et al. 2012, Sadeque et al. 2017). Ppo-1 분석 결과(Table 2, Fig. 4A), Ppo-A1a (685 bp)는 22개 품종(경광, 고분, 그루, 금강, 다중, 백강, 백찰, 새금강, 수안, 안백, 올, 은파, 조경, 조농, 조은, 조한, 중모2003, 중모2004, 중모2008, 탑동, 태중, 황금알)이었고, Ppo-A1b (876 bp)는 28개(고소, 남해, 다분, 다홍, 밀성, 백중, 새올, 서둔, 수강, 신미찰, 신미찰 1호, 알찬, 연백, 영광, 올그루, 우리, 장광, 적중, 조광, 조아, 조중, 조품, 중모2012, 진품, 진풍, 청계, 한백, 호중)이었다. 국내 품종에서도 Ppo-A1a를 지닌 품종이 Ppo-A1b 품종보다 PPO 활성이 높아 밀가루와 국수 색택이 어두운 특성을 지닌 것으로 나타났다(Kim et al. 2012a). Ppo-B1a (400 bp)는 37개 품종(경광, 고분, 고소, 그루, 남해, 다분, 다중, 다홍, 밀성, 백중, 백찰, 새올, 서둔, 수강, 수안, 신미찰, 신미찰 1호, 안백, 알찬, 연백, 영광, 올, 올그루, 우리, 장광, 조광, 조농, 조아, 조중, 조품, 중모2012, 진품, 진풍, 청계, 탑동, 한백, 호중)이었으며, Ppo-B1b (400 bp, 600 bp)는 13품종(금강, 백강, 새금강, 은파, 적중, 조경, 조은, 조한, 중모2003, 중모2004, 중모2008, 태중, 황금알)으로 나타났다. 그루, 조광, 조농, 조한과 한백을 포함한 5개 품종은 Ppo-D1b (490 bp)로 나타났으며, 나머지 45개 품종은 Ppo-D1a (713 bp)로 나타났다. Ppo-D1a는 Ppo-D1b 보다 PPO 활성이 낮은 것으로 알려져 있으며(He et al. 2007), 이전 결과에서도 국내 품종은 대부분 Ppo-D1a를 지닌 것으로 나타났다(Kim et al. 2012a). Ppo-A1과 Ppo-D1에 대한 PPO 활성 정도는 국내 품종이나 외국 품종에 대해서 많이 밝혀졌지만, Ppo-B1의 유전적 조성에 따른 PPO 활성 차이는 많은 연구가 이루어져 있지 않다. Ppo-B1이나 Ppo-2에 비해서 Ppo-A1과 Ppo-D1이 PPO 활성에 대한 기여도가 높다고 알려져 있지만, 최근 연구에서는 Ppo-2가 등숙중인 종실에서 PPO활성의 72% 기여한다는 보고가 있다(Beecher & Skinner 2011, Hystad et al. 2015). 본 연구에서 국내 품종에 대한 Ppo-B1의 유전적 조성을 보고하였지만, 국내 품종의 종실 및 밀가루 색택 개선을 위한 Ppo-B1 및 Ppo-2에 대한 관련 연구가 필요할 것으로 생각한다. PPO 활성이 없는 null 계통 육성이나 GWAS (genome-wide association studies)를 이용한 색택 개선 연구도 활발하게 이루어지고 있기 때문에 국내에서도 관련 연구가 필요하다(Hystad et al. 2016, Zhai et al. 2020).

Fig. 4. Amplification profiles of alleles at Ppo-A1 (A), Ppo-B1 (B) and Ppo-D1 (C) of Korean wheat cultivars. M, Size marker; 1, Suan; 2, Kyungkwang; 3, Baekkang; 4, Saekkeumkang; 5, Geuru; 6, Jonong; 7, Johan; 8, Uri; 9, Baekjoong; 10, Jeokjoong; 11, Chokwang; 12, Hanbaek.

L-DOPA assay에서 착색되지 않고 밝았던 26개 품종의 Ppo-1 유전적 조성을 비교해 보면, PPO 활성이 낮은 유전적인 조성은 Ppo-A1b, Ppo-B1a와 Ppo-D1a인데, 13개 품종이 Ppo-A1b를 지녔으며, 그 중에 한백을 제외한 12품종(고소, 백중, 다분, 적중, 조아, 조중, 조품, 중모2012, 수강, 신미찰, 신미찰 1호, 호중)이 Ppo-A1b/Ppo-D1a였고, 이들 12개 품종 중에서 적중을 제외한 11개 품종은 Ppo-B1a를 지녔다. Ppo-A1b/Ppo-B1a/Ppo-D1a유전자형을 지닌 백립계 품종인 백중, 다분과 중모2012는 낮은 PPO 활성을 지닐 것으로 예상되기 때문에 밀가루 색택 및 국수 면대와 관련 특성에 대한 면밀한 검토를 통하여 국산밀 색택 개선의 자원으로 활용을 검토해 볼 필요가 있다.

종자 특성과 관련된 유전자 분석에는 TaCWI-4A, TaGW2-6A와 TaSuS2-2B를 이용하였으며, TaCWI-4A는 세포벽 전환 효소로 설탕을 포도당과 과당으로 가수분해 하는 효소로 프로모터 부분의 2개(T/C)의 SNP가 표지인자로 활용되고 있으며, TaGW-6A는 소수(spikelet) 껍질의 세포분열을 조절하여 종자의 단폭을 조절하는 유전자로 2개(A/G)의 SNP가 표지인자로 활용되고 있고, TaSuS2-2B는 설탕을 전분으로 전환하는 효소인 설탕 합성효소(Sucrose synthase, SUS)로 Hap-H/Hap-L을 표지인자로 활용되고 있다(Su et al. 2011, Huo et al. 2014, Jiang et al. 2015).

종자 특성과 관련된 유전자 분석 결과(Table 2, Fig. 5), TaCWI-4A에서는 8개(고소, 남해, 신미찰, 신미찰 1호, 올, 올그루, 조아, 태중)만이 Hap-4A-T를 지닌 것으로 나타났고, 나머지 42개 품종은 Hap-4A-C로 나타났다. Hap-6A에서는 Hap-6A-A를 지닌 품종이 32개(고분, 고소, 남해, 다중, 밀성, 백중, 백찰, 새올, 서둔, 수안, 신미찰, 신미찰 1호, 안백, 알찬, 올, 올그루, 우리, 은파, 적중, 조광, 조농, 조아, 조은, 조중, 조품, 조한, 중모2003, 중모2008, 진품, 청계, 탑동, 호중)로 Hap-6A-G를 지닌 18개 품종(경광, 그루, 금강, 다분, 다홍, 백강, 새금강, 수강, 연백, 영광, 장광, 조경, 중모2004, 중모2012, 진풍, 태중, 한백, 황금알)보다 많았다. TaSuS2-2B에서는 9개(백강, 백중, 연백, 적중, 조경, 조은, 태중, 한백, 황금알)만이 Hap-L을 지닌 것으로 나타났고, 나머지 41개 품종은 Hap-H로 나타났다.

Fig. 5. Amplification profiles of alleles at TaCWI-4A (A), TaGW2-6A (B) and TaSus2-2B (C) of Korean wheat cultivars. M, Size marker; 1, Ol; 2, Namhae; 3, Joa; 4, Goso; 5, Olgeuru; 6, Geuru; 7, Jonong; 8, Saeol; 9, Saekeumkang; 10, Hwangkeumal; 11, Joeun; 12, Taejoong.

영상 이미지 분석

국산 밀 품종의 영상 이미지 분석 결과(Table 3), 종자 길이(GL)는 평균 6.8 mm (6.0-7.7 mm)였고 한백과 중모2012는 7.7 mm 이상으로 길었으며, 신미찰과 연백은 6.9 mm 이하로 다른 품종 보다 짧았다. 종자의 평균 폭(GW)은 3.4 mm (3.1-3.8 mm)였고, 태중이 3.8 mm로 가장 컸으며, 다홍과 다중이 3.1 mm 이하로 적었다. 종자 둘레(GP)의 평균은 17.6 mm (15.7-19.7 mm)였고, GL이 길었던 한백과 중모2012는 19.5 mm 이상으로 길었으며, GL이 짧았던 다홍을 포함해서 알찬, 밀성과 청계가 15.9 mm 이하로 짧았다. 종자의 평균 면적(GA)은 18.5 mm² (14.8-22.9 mm²)였으며, 한백과 중모2012가 22.5 mm²으로 다른 품종에 비해 컸으며, 다홍은 14.8 mm²으로 국내 품종 중에서 제일 작았다. 국내 품종에서는 종자가 길수록 GP (r=0.98***)와 GW (r=0.62***)도 큰 것으로 나타났고, GA도 GL (r=0.92***), GW (r=0.88***) 및 GP (r=0.98***)와 정의 상관을 나타내었다(Table 4). 종자 길이와 폭의 비율(AR)과 원형률(GC)의 평균값은 각각 2.00 (1.79-2.39)와 0.75 (0.69-0.79)였고, 국내 품종 중에서 다중이 AR이 2.39로 가장 높았으며, GC는 0.69로 가장 낮았고, 안백은 반대로 GC가 가장 높았고(0.79) AR이 가장 낮았다(1.79). AR은 GL (r=0.61***)와 GP (r=0.45**)와는 정의 상관을 보였지만, GW나 GA와는 상관이 없었고, GC와는 부의 상관(r=-0.97***)을 나타내어 GC와 GL (r=0.61***)와 GP (r=0.45**)도 부의 상관을 나타내었다(Table 4).

Table 3

Grain characteristics using image analysis of Korean wheat cultivars.

No	Cultivar	Grain length (mm)	Grain width (mm)	Grain perimeter (mm)	Grain area (mm2)	Grain aspect	Grain circularity
1	Alchan	6.0	3.3	15.8	15.6	1.83	0.78
2	Anbaek	6.6	3.7	17.5	19.1	1.79	0.79
3	Baekchal	6.6	3.5	17.2	18.3	1.86	0.78
4	Baekjoong	6.6	3.4	17.2	17.8	1.95	0.75
5	Baekkang	7.3	3.6	18.6	20.8	2.04	0.75
6	Chokwang	7.0	3.4	17.9	18.9	2.04	0.74
7	Chunggye	6.1	3.1	15.8	15.1	1.98	0.75
8	Dabun	6.8	3.4	17.5	18.2	2.02	0.75
9	Dahong	6.1	3.1	15.7	14.8	2.02	0.75
10	Dajoong	7.2	3.1	17.8	17.4	2.39	0.69
11	Eunpa	6.4	3.3	16.5	16.6	1.93	0.76
12	Geuru	7.2	3.6	18.5	20.4	2.01	0.74
13	Gobun	6.6	3.3	16.9	17.1	2.03	0.74
14	Goso	6.9	3.5	17.9	19.3	1.97	0.75
15	Hanbaek	7.7	3.7	19.5	22.5	2.07	0.74
16	Hojoong	7.1	3.5	18.2	19.7	2.05	0.74
17	Hwangkeumal	7.2	3.5	18.3	20.0	2.05	0.74
18	Jangkwang	6.6	3.4	17.1	17.7	1.93	0.76
19	Jeokjoong	6.9	3.6	18.0	19.5	1.96	0.75
20	Jinpoom	6.3	3.2	16.2	15.7	1.99	0.75
21	Jinpoong	6.2	3.4	16.4	16.7	1.83	0.78
22	Joa	7.1	3.5	18.3	19.7	2.04	0.74
23	Joeun	6.5	3.4	16.9	17.6	1.91	0.77
24	Johan	6.7	3.4	17.2	17.7	2.00	0.75
25	Jojoong	6.8	3.3	17.3	17.8	2.04	0.74
26	Jokyung	7.2	3.7	18.6	20.9	1.99	0.75
27	Jonong	7.1	3.5	18.1	19.6	2.02	0.75
28	Joongmo2003	6.6	3.6	17.6	19.1	1.84	0.77
29	Joongmo2004	7.1	3.6	18.4	20.3	1.99	0.75
30	Joongmo2008	7.5	3.4	18.9	20.3	2.21	0.71
31	Joongmo2012	7.7	3.8	19.7	22.9	2.07	0.74
32	Jopum	7.1	3.3	18.1	18.7	2.17	0.72
33	Keumkang	7.1	3.7	18.3	20.4	1.95	0.76
34	Kyungkwang	7.0	3.3	17.8	18.5	2.11	0.73
35	Milsung	6.1	3.2	15.9	15.5	1.92	0.77
36	Namhae	6.2	3.3	16.4	16.4	1.88	0.76
37	Ol	6.3	3.3	16.5	16.5	1.94	0.76
38	Olgeuru	6.8	3.5	17.7	18.8	1.96	0.76
39	Saekeumkang	7.3	3.6	18.6	20.5	2.07	0.74
40	Saeol	7.1	3.3	17.8	18.2	2.18	0.71
41	Seodun	6.3	3.3	16.3	16.2	1.92	0.77
42	Shinmichal	6.9	3.4	17.6	18.6	2.01	0.75
43	Shinmichal1	6.3	3.3	16.4	16.4	1.94	0.76
44	Suan	7.2	3.5	18.4	20.2	2.06	0.74
45	Sukang	6.6	3.5	17.2	17.9	1.93	0.76
46	Taejoong	7.4	3.8	19.1	22.0	1.94	0.76
47	Tapdong	6.5	3.4	16.8	17.2	1.94	0.76
48	Uri	6.8	3.3	17.3	17.7	2.10	0.74
49	Younbaek	6.9	3.5	17.8	19.1	1.94	0.75
50	Yungkwang	7.0	3.5	18.0	19.1	2.03	0.74
LSDz		0.1	0.1	0.2	0.4	0.02	0.01

^zLeast significant difference (p=0.05). Differences between two means exceeding this value are significant.

Table 4

Coefficients of correlations among grain characteristics of 50 Korean wheat cultivars.

Parameter	Grain length	Grain width	Grain perimeter	Grain area	Grain aspect
Grain width	0.62***z
Grain perimeter	0.98***	0.76***
Grain area	0.92***	0.88***	0.98***
Grain aspect	0.61***	-0.24	0.45**	0.25
Grain circularity	-0.61***	0.21	-0.46**	-0.26	-0.97***

^z** and *** are significant at p=0.01 and p=0.001, respectively.

종자의 영상 이미지 분석 결과를 화학적 처리를 통한 외관 검사 결과에 따른 특성 차이를 살펴보면(Table 5), 종피색에서는 백립계 품종의 GL, GW, GA와 GP (7.1 mm, 3.6 mm, 18.3 mm, 20.0 mm²)가 적립계에 비해서(6.7 mm, 3.4 mm, 17.3 mm, 18.0 mm²) 큰 것으로 나타났으며, PPO 활성에서는 높은 품종의 GL, GW, GA와 GP (7.0 mm, 3.5 mm, 17.9 mm, 19.2 mm²)가 낮은 품종보다(6.7 mm, 3.4 mm, 17.2 mm, 17.9 mm²) 큰 것으로 나타났지만, AR과 GC는 차이가 없었다. 적립계이면서 PPO 활성이 낮은 20개 품종의 GL은 6.6 mm로 다른 품종에 비해서 짧았으며, 백립계이면서 PPO 활성이 높은 6개 품종의 GL은 7.2 mm로 길었다(Fig. 6A). GW, GP와 GA는 PPO 활성이 높은 백립계 품종(3.6 mm, 18.4 mm, 20.3 mm²)이 컸으며, PPO 활성이 낮은 적립계 품종(3.3 mm, 17.0 mm, 17.4 mm²)은 낮았다. Tamyb10 유전자 조성에 따른 GL의 차이를 보면, Tamyb10-Aa (7.0 mm), Tamyb10-Ba (7.0 mm)와 Tamyb10-Da (6.9 mm)를 지닌 품종이 Tamyb10-Ab (6.7 mm), Tamyb10-Bb (6.7 mm)와 Tamyb10-Db (6.4 mm)를 지닌 품종에 비해 GL가 길었으며(Fig. 6B), GP와 GA에서도 같은 경향을 보였다. Tamyb10-Aa와 Tamyb10-Ba를 지닌 품종의 GW가 Tamyb10-Ab와 Tamyb10-Bb보다 컸지만, Tamyb10-D에서는 차이가 없었고, AR과 GC 역시 유전자형에 따른 차이가 발견되지 않았다. Tamyb10 유전자 조성에서 백립계를 보이는 품종은 다른 유전자 조성에 비해서 GL, GW, GP와 GA (7.1 mm, 3.6 mm, 18.3 mm, 20.0 mm²)은 다른 품종에 비하여 큰 것은 종피색에 따른 차이와 일치했으며, 백립계 품종의 유전적 조성을 제외한 품종 간에는 차이가 없었다.

Table 5

Difference in grain characteristics using image analysis according to grain color, PPO (polyphenol oxidase) activity and allelic variations among 50 Korean wheat cultivars.

Characteristics		Grain length (mm)	Grain width (mm)	Grain perimeter (mm)	Grain area (mm2)	Grain aspect	Grain circularity
White grainz		7.1ax	3.6a	18.3a	20.0a	1.99a	0.75a
Red grain		6.7b	3.4b	17.3b	18.0b	2.00a	0.75a
PPO activityy	High	7.0a	3.5a	17.9a	19.3a	2.01a	0.75a
	Low	6.7b	3.4b	17.2b	17.9b	1.98a	0.75a
Tamyb10-A	a	7.0a	3.5a	17.9a	19.3a	2.01a	0.75a
	b	6.7b	3.4b	17.2b	17.8b	1.99a	0.75a
Tamyb10-B	a	6.9a	3.5a	17.7a	18.7a	2.00a	0.75a
	b	6.4b	3.3a	16.6b	16.9b	1.99a	0.75a
Tamyb10-D	a	7.0a	3.5a	17.9a	19.2a	2.00a	0.75a
	b	6.7b	3.4b	17.2b	17.9b	1.93a	0.76a
Ppo-A1	a	6.9a	3.5a	17.8a	19.1a	2.00a	0.75a
	b	6.7a	3.4b	17.3a	18.0b	1.99a	0.75a
Ppo-B1	a	6.8b	3.4b	17.4b	18.1b	2.00a	0.75a
	b	7.0a	3.6a	18.1a	19.7a	1.99a	0.75a
Ppo-D1	a	6.8a	3.4a	17.5a	18.4a	1.99a	0.75a
	b	7.1a	3.5a	18.3a	19.8a	2.03a	0.74a
TaCWI-4A	Hap-4A-C	6.8a	3.4a	17.6a	18.5a	2.00a	0.75a
	Hap-4A-T	6.8a	3.5a	17.5a	18.5a	1.96a	0.75a
TaGW2-6A	Hap-6A-A	6.7b	3.4b	17.3b	17.9b	1.99a	0.75a
	Hap-6A-G	7.0a	3.5a	18.1a	19.6a	2.00a	0.75a
TaSus2-2B	Hap-H	6.8b	3.4b	17.4b	18.2b	2.00a	0.75a
	Hap-L	7.1a	3.6a	18.2a	20.0a	1.98a	0.75a

^zGrain color was determined by NaOH and Ninhydrin treatments.

^yPPO activity was determined by the color of L-DOPA assays.

^xValues followed by the same letters within each gene or characteristic are not significantly different at p<0.05.

Fig. 6. Difference in grain length according to the combination of grain color and PPO activity (A), Tamyb10 (B), Ppo-A1b and Ppo-B1a (C), and TaGW2-6A and TaSus2-2B (D) in 50 Korean wheat cultivars. Each bar represents the mean±standard error. Bars with different letters above are significantly different at p<0.05.

Ppo-A1a 대립유전자를 지닌 품종의 GW와 GA (3.5 mm, 19.1 mm²)은 Ppo-A1b (3.4 mm, 18.0 mm²)보다 컸지만 GL과 GP에는 차이가 없었다. Ppo-B1b 대립유전자를 지닌 품종의 GL, GW, GP, GA (7.0 mm, 3.6 mm, 18.0 mm, 19.7 mm²)은 Ppo-B1a (6.8 mm, 3.4 mm, 17.4 mm, 18.1 mm²) 보다 컸지만, Ppo-D1유전 변이에 따른 차이는 없었고, AR과 GC도 Ppo-1유전자 조성에 따른 차이가 없었다. Ppo-A1a와 Ppo-B1b를 지닌 12개 품종의 GL (7.0 mm)은 Ppo-A1b와 Ppo-B1a를 지닌 27개 품종(6.7 mm)보다 길었으며, 다른 유전자 조합에서는 차이가 없었다(Fig. 6C). GW, GP와 GA도 Ppo-A1a와 Ppo-B1b를 지닌 품종이 Ppo-A1b와 Ppo-B1a를 지닌 품종보다 컸다. 국내 품종과 호주, 미국 밀에서 Ppo-A1의 경우 Ppo-A1a의 유전자를 지닌 품종의 종자 크기가 Ppo-A1b를 지닌 품종보다 크고, PPO 활성도 더 높았지만(Baik et al. 1994, Kim et al. 2012a), Ppo-B1은 종실 크기와 PPO 활성에 대한 연구 결과는 없다. Ppo-A1a의 여부에 따라 종자 크기와 PPO 활성이 영향을 받는 것으로 추정되나, Ppo-B1 및 Ppo-2에 대한 PPO 활성의 추가적인 연구가 필요하다.

TaGW2-6A에서 Hap-6A-G의 대립유전자를 지닌 품종의 GL, GW, GP와 GA (7.0 mm, 3.5 mm, 18.1 mm, 19.6 mm²)는 Hap-6A-A의 대립유전자를 지닌 품종(6.7 mm, 3.4 mm, 17.3 mm, 17.9 mm²)보다 컸으며, TaSus2-2B에서 Hap-L의 대립유전자를 지닌 품종의 GL, GW, GP와 GA (7.1 mm, 3.6 mm, 18.2 mm, 20.0 mm²)이 Hap-H (6.8 mm, 3.4 mm, 17.4 mm, 18.2 mm²)보다 컸다. TaCWI-4A 유전자형에 따른 종자 특성은 차이가 없었으며, AR과 GC도 이들 유전자의 조성에 따른 차이는 나타나지 않았다. TaGW2-6A와 TaSus2-2B 유전자 조성에 따른 종자 특성이 차이가 있었지만, 이들 유전자를 함께 분석한 결과에서는 유전자 조성에 따른 종자 특성의 차이는 나타나지 않았다(Fig. 6D). 국내 품종의 TaGW2-6A에서 Hap-6A-G를 지닌 품종의 천립중, 종자 길이, 폭과 두께는 Hap-6A-A보다 높았으며, TaSus2-2B에서 Hap-L의 천립중, 종자 길이, 크기와 폭이 Hap-H보다 컸다(Kim et al. 2020). 중국 품종에서는 Hap-6A-A와 Hap-H를 지닌 품종이 Hap-6A-G와 Hap-L을 지닌 품종보다 천립중이 높았지만(Li et al. 2019), 국내 품종에서는 반대 경향이 나타났다(Kim et al. 2020). 종자 길이와 폭이 크면 종자의 무게도 높아지기 때문에 국내 품종의 이전 결과와 본 연구 결과는 같은 경향을 나타내는 것으로 보인다. 중국 품종의 결과와 반대의 결과를 보이는 것은 중국 품종의 유전적인 특성과 등숙 환경의 차이에서 기인한것으로 보이며, 국내 육종 집단에 적용하기 위해서는 종실 특성 및 수량성 관련 표지인자 개발과 등숙 환경이 미치는 영향에 대한 분석이 필요하다.

종자의 영상 이미지 분석 결과를 NbClust Package의 휴버트 지수(Hubert index)와 D index를 활용하여 군집분석으로 영상이미지의 분산분석의 변이를 99.6% 설명이 가능했으며, 군집분석 한 결과 2개 군집으로 나눌 수 있었다(Fig. 7). 군집 I과 II에 각각 21개와 29개 품종이 속했으며, 군집 I의 GL, GW, GP와 GA가 군집 II에 비해 높았고, 백립계 품종이 군집II에 10개 품종인 반면 군집 I에는 백중, 백찰과 중모2003이 포함되었다. 2000년 이전 육성 품종은 군집 I에서 62%로 높았고, 군집 II는 반대로 2000년 이후 육성 품종이 69%로 많았다. 군집 I은 2000년 이전에 육성된 종자가 큰 적립계 품종이 주로 속하였고, 군집II는 2000년 이후 육성된 백립계 품종과 적립계 품종 중에 비교적 종자 크기가 적은 품종이 속한 것으로 분류되었다

Fig. 7. Scattered diagram of grain characteristics of 50 Korean wheat cultivars. Cultivar names for each number are identical as in Table 2.

군집간 PPO 활성은 차이가 없었으며, Ppo-1 유전자 조성을 비교해 보면, 군집 I은 Ppo-A1b/Ppo-B1b/Ppo-D1a을 지닌 품종 비율이 57%로 높았고, 군집 II에서는 Ppo-A1b/Ppo-B1a/Ppo-D1a 유전자형이 45%로 가장 많았다. Ppo-A1 유전자가 국내 품종에서 종자 크기 및 PPO활성에 영향이 있지만 Ppo-B1 유전자 역시 이들 특성에 영향을 미치는 것으로 보이는데, 이러한 결과가 군집 II에 속한 백립계 품종의 영향인지 본 연구에서는 수행되지 못한 환경적인 영향 인지에 대한 후속 연구가 필요하다. 군집 I은 높은 천립중이나 종자 무게가 무거운 국내 품종에서 발현되는 TaCWI-4A의 Hap-4A-C, TaGW2-6A의 Hap-6A-A와 TaSus2-2B의 Hap-H가 각각 86%, 81%, 90%로 높았으며, 군집 II에서도 이들 유전자 비율이 83%, 52%와 75%로 높았다. 또한, 종자 크기가 큰 대립유전자 조합으로 밝혀진 TaGW2-6A의 Hap-6A-G와 TaSus2-2B의 Hap-L를 동시에 갖는 품종은 모두 군집 II에 속하였다. 본 연구에서도 종자 무게 및 천립중 관련 유전자형과 국내 품종의 영상 이미지를 통한 종자 외형 분석 결과와 차이를 보였다. 이러한 결과는 본 연구가 년차간 변이와 환경 변이를 충분히 반영하지 못한 부분이 있지만, 수량 증대와 제분율 향상 및 품질 고급화의 육종 목표 달성을 위해서 제분율이 높고 제빵 적성이 좋은 금강이 교배본으로 많이 활용되었고, 이러한 결과 2000년 이후 육성된 품종에서는 천립중이 45 g이상으로 높은 품종이 많다. 이러한 국내 육종의 특징으로 인해서 품종의 영상이미지 분석이 기존의 종자 무게 관련 표지인자와 명확하게 일치하지 않기 때문에 국내 품종의 순도 검정 체계 구축을 위한 후속 연구가 필요하다. 수입 원맥에 비해서 국내 품종은 천립중이 높은데 국내 품종에서도 천립중이 크고 종자 크기가 큰 품종일수록 수발아에 약한 특성이 있고(Kim et al. 2012b, Shin et al. 2013), 국내 밀 재배 환경에서 등숙기 기온의 상승과 외국에 비해 짧은 등숙일수를 고려한다면 등숙 충실도를 고려한 국내 재배 환경에 맞는 천립중과 종자 크기 관련 연구가 필요하다.

국산밀 품종의 순도 관리에 필요한 기초 자료 제공을 위하여 국산밀 50 품종에 대해서 종자의 화학적 외관 검사, 종실 특성 관련 유전자 및 영상 이미지 분석을 실시하였다. 화학적 외관 검사를 통하여 50개 품종은 백립계(26%)와 적립계(74%), PPO활성이 높은 품종(48%)과 낮은 품종(52%)으로 구분되었으며, 종피색은 관련 유전자인 Tamyb-10 분석 결과, 백립계 품종은 모두 Tamyb-A1a/Tamyb-B1a/Tamyb-D1a를 지녔으며, 적립계 품종에서는 5가지 유전자형(aba, abb, baa, bba, bba)이 나타났다. PPO활성이 높은 품종은 Ppo-A1a/Ppo-B1b/Ppo-D1b의 비율이 높았고, 낮은 품종은 Ppo-A1b/Ppo-B1a/Ppo-D1a의 비율이 높았다. 암막 챔버에 30 mm MACRO 렌즈와 무선 리모컨이 연결된 디지털 카메라를 활용하여 종자 영상이미지를 분석하였으며, 국내 밀 품종은 종자 길이가 길수록 종자의 폭, 둘레 및 면적이 커지는 경향을 보였다. 종자 영상이미지의 군집 분석 결과, 2000년 이전에 육성된 종자가 큰 적립계 품종과 2000년 이후 육성된 백립계 품종과 종자 크기가 적은 적립계 품종으로 분류되었다. 국산밀 순도 관리를 위해 국내 재배 및 등숙 환경이 종실 특성에 미치는 영향의 종합적인 분석, 종자 이미지 분석 체계 확립 및 관련 표지인자 개발을 포함한 추가적 연구가 필요하다.

본 연구는 농촌진흥청 연구사업(세부과제명: 밀 품질 균일화를 위한 대규모 시범단지의 품질 분석 및 모니터링, 과제번호: PJ0159652021)과 전북대학교 연구기반 조성비 지원에 의해 이루어졌음