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Korean. J. Breed. Sci. : Korean Journal of Breeding Science

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식물육종신기술(NPBTs)의 발전에 따른 신규식물(Novel Plant)의 위해성평가 동향

Novel Plant Breeding Techniques and Risk Assessment

Korean Journal of Breeding Science 2014;46(4):333-341.
Published online: October 31, 2014

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*Corresponding Author : (todanf@korea.kr, Tel: +82-63- 253-4701, Fax: +82-63-253-4704)
• Received: October 14, 2014   • Revised: November 7, 2014   • Accepted: November 9, 2014

© Tshe Korean Society of Breeding Science All rights reserved

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  • In recent years, novel plant breeding techniques (NPBTs) have emerged, and safety assessment of the novel plant(s) generated using the NPBTs has drawn the attention of many stakeholders. The notable characteristics of the novel plants are as follows: firstly, it is almost impossible to distinguish from the natural mutations in the conventional counterparts, because site-directed nuclease (SDN) and oligonucleotide-directed mutagenesis (ODM) could introduce short indel(s) in the targeted region(s) of the chromosomes. Secondly, the genome constitution of novel plants is almost identical to that of their conventional counterparts, eventually becoming indistinguishable by the introduction of only unmodified gene(s) from sexually compatible species to the target host plant. Thirdly, it is possible to generate new plants that have the desired traits, but without introducing genes. These plants will have some modified bases in their genome by selecting null-segregant(s) from heterozygous transgenic plants or by other epigenetic methods. The Organisation for Economic Co-operation and Development (OECD) and many countries developing genetically modified organisms (GMOs) have concluded that novel plants developed using SDN, ODM, cisgenesis, intragenesis, or null-segregant techniques are treated in the same manner as non-genetically modified (GM) plants or may even have less strict risk assessments depending on the case. Additionally, grafting and agro-infiltration are methods that can be used to avoid or reduce the burden of current strict GMO risk assessment. The risk assessments of some of the novel plants have already been performed and those of commercially important plants are expected to be performed in the near future. Hence, it is necessary to develop a competitive and practical NPBT that can mitigate the concern and revulsion toward GMOs in Korea.
최근 국제적으로 주곡작물의 수급동향에서 중요한 비중을 차지하는 것이 유전자변형생물체(Genetically Modified Organism, GMO) 작물이다. 2013년의 유전자변형작물(GM작물) 재배 국가는 27개국, 재배면적은 1억 7천 5백만 헥타르(ha)에 달하 고, 약 1천 8백만 농민이 GM작물을 재배하고 있다(ISAAA 2013). 전 세계적으로 상업화 승인된 GMO는 2012년 기준으 로 25작물(196품종)에 이르고 있다. 국내에 수입 승인된 GMO는 총 107건(2013년 12월 기준)인데, 농업 및 식품 공 용으로 88건, 사료용 16건(미생물 1건 포함) 및 농업용 3건이 다(KBCH 2014). 또한 국내에 수입 승인된 식용 및 농업용 GM작물의 양은 약 888만 톤으로 28.6억 달러 규모에 달하고 있다.
일반적으로 GM작물은 생명공학기술에 의하여 인위적으로 조작된 유전자가 식물에 도입된 작물로서, 대개의 경우 미생 물 유래의 유전자 발현조절인자인 프로모터와 터미네이터, 항 생제내성 또는 제초제 내성을 지니는 선발표지유전자 및 측 면경계서열(border sequence)이 도입되게 된다. 현재 상업화 된 GM작물은 과학적 실험에 입각하여 엄격한 위해성(안전 성)평가 절차를 거친 후 재배/판매가 허용되지만, 종종 이러 한 외래의 도입유전자를 갖는 GM작물이 인체와 동물 또는 환경에 미칠 수 있는 잠재적 위해성이 사회적 이슈가 되고 있 다. 예를 들면, 제초제저항성 옥수수(NK603)의 실험동물을 이용한 실험에서 종양을 일으킬 가능성이 높다는 연구결과 (Séralini et al. 2012), 제초제내성 옥수수 재배 지역에서의 제초제내성 슈퍼잡초의 번성(Powles & Yu 2010), 황금벼(비 타민A 쌀)의 아동 대상 인체실험(Tang et al. 2012), 해충저 항성 Bt벼에 의한 해충군집 변화(Qiu 2008), GM작물의 화분 이동에 의한 자연교잡 발생 가능성(Pasquet et al. 2008), 비 의도적 유출에 의한 GM작물의 번식(NIER 2012) 등의 문제 들이다. 이들 위해성에 관한 논란 사례들은 과학적 분석오류 의 결과로 반박되거나, 부분적으로 GM작물의 문제점이 인정 되거나, 작물 재배방법의 개선에 의한 문제해결이 가능하거나 또는 사회적/문화적 인식 차이에서 비롯되는 등의 이유에 기 인한다고 보고되고 있다.
근래 10여 년 사이 과학기술의 발전으로 작물육종을 위한 신기술(Novel Plant Breeding Techniques, NPBTs)들이 부 각되고 있다. 이들 기술의 두드러진 특징은 목적형질(유전자) 을 원하는 위치에서 정확하게 도입하거나, 도입된 유전자의 존재 없이 목적 기능을 나타내거나 또는 유전자의 인위적 조작 과정을 거쳐서 생산된 식물이 전통육종으로 생산된 non-GM 과 구별이 거의 불가능한 식물을 만드는 장점을 갖고 있다는 것이다. 이러한 NPBTs를 이용하여 만든 이른바 신규식물(또 는 신식물, Novel Plant)이라 불리는 형질전환작물이 개발되고 있다. 최근의 중요한 이슈는 전통육종으로 만들어진 non-GM 재배종과 구별이 거의 불가능한 신규식물의 경우에 현재의 GMO 관련 규제(법)를 어떻게 적용하여야 하는지의 문제이 다. 신규식물들이 개발되어 상업화를 목전에 둔 현실에서 이 들의 환경위해성평가와 신규식물에서 유래한 신규식품 및 사 료의 안전성평가에 대한 국제적 합의를 도출하여야 하는 시 점이 되었다. 또한 이들 신규 식물, 식품 및 사료의 국가 간 이동에 적용되는 GMO 규제 문제에 대한 국제적 합의도 시 급하다. 이러한 상황에서 경제협력개발기구(Organization for Economic Cooperation and Development, OECD)를 비롯 한 많은 국제기구 및 관련학회에서 이에 관한 컨퍼런스, 학회, 국제회의 등을 진행하고 있다. 본 논문에서는 최근 부각된 식 물육종신기술에 대한 간단한 소개, 신기술을 적용하여 개발된 식물의 현황, GMO 규제 적용 면제조건 여부 및 신규 식물의 위해성평가 동향에 관하여 고찰하고자 하였다.
식물육종신기술(NPBTs)에 대한 간단한 소개
최근 OECD는 식물육종신기술을 정리하여 분류하였는데 이러한 신기술들은 새로 개발된 기술은 아니고 예전부터 그 원리와 기법이 밝혀진 기술들이다. OECD의 NPBT워크숍 준 비자료(OECD 2014)에 의하면, 이들 7개의 기술은 1) Site Directed Nucleases (SDN), 2) Oligonucleotide Directed Mutagenesis (ODM), 3) Cisgenesis/Intragenesis, 4) Reverse Breeding (RB), 5) RNA-directed DNA Methylation (RdDM), 6) Grafting on GM-rootstock on wild-type Scion 및 7) Agroinfiltration이다. EU는 위의 기술에 합성생물학(Synthetic biology) 을 포함하여 8개 기술을 신기술로 정의하며 EU의 합성생물 학 개념은 세포 또는 염색체를 redesign 하거나 합성하여 새 로운 종 또는 물질을 만드는 것이다. 이와는 달리, 생물다양성 협약(CBD) 의정서 위해성평가 분야에서의 합성생물학 개념 은 위의 8개 신기술을 모두 포함하고 생물정보학, 대사공학, 공학 등의 관련분야를 포괄하여 확대 적용하고 있다.
Site Directed Nucleases (SDN)
SDN은 단백질 복합체이며 특정 DNA sequence를 인식하 고 결합하는 기능의 단백질 부분과 인식된 DNA를 절단(sitespecific double strand break, DSB)하는 nuclease(예, Fok I 제한효소의 nuclease domain) 기능을 갖는 부분으로 구성되 어 있다. 이 복합체를 코딩하는 유전자를 식물 핵에 형질전환 하거나 단백질복합체를 식물 핵 내로 직접 도입할 경우, 발현 된(또는 도입된) 단백질 복합체가 목표부위를 인식하여 DNA 를 절단하게 된다. 이후 세포의 내재 복구(repair) 시스템에 의하여 염색체 연결이 진행된다. SDN-1 type은 절단 위치에 서 non-homologous end joining (NHEJ) 시스템에 의하여 복구가 진행되는 과정에서 불특정 염기의 결실 또는 첨가되 는 변이가 발생하게 되어 특정 유전자 발현이 변화된 식물을 만드는 것이다. 형질전환방법을 이용한 SDN기술은 형질전환 체 후대 분리세대의 유전자 분석을 통하여 SDN복합체 유전 자가 존재하지 않고 의도한 돌연변이가 발생한 개체를 선별 하여 이용한다.
SDN-2 type의 경우, SDN과 함께 target sequence(DSB 부분)에 한 개의 염기가 변형된 염기서열을 갖고 있는 재조합 DNA단편(repair template)을 인위적으로 제공하면 homologous recombination에 의하여 새로운(repair template) DNA가 도 입된 식물체를 만들 수 있게 된다. 이 방법은 SDN-1과 달리 목적하는 정확한 위치에서 단일염기의 변형을 추구할 수 있 다. SDN-3는 SDN에 의하여 발생한 DSB에 목적유전자(일 반적으로 gene)를 도입할 때 이용하는 방법이다. 도입하고자 하는 유전자단편의 양 말단에 도입위치(DSB가 일어나는 위 치)와 상동적인 DNA서열이 존재하는 repair template를 SDN과 함께 제공하면 내재하는 복구 시스템인 homologous recombination에 의하여 유전자가 도입되는 방법이다. 대표 적인 SDN 시스템으로는 Zinc Finger Nucleases (ZFNs), Transcription-activator Like Effector Nucleases (TALENs), Mega Nucleases (MNs), CRISPR/Cas-9이 있다.
ZFN은 3개의 염기를 선택적으로 인식하는 zinc finger의 조합(예, 5개의 zinc finger를 조합하면 15개의 염기서열 인 식)을 통한 DNA binding과 nuclease의 조합으로 구성되어 있다. ZFN기술을 이용한 대표적인 예로는 Townsend et al. (2009)은 ZFN-1 기술을 이용하여 제초제내성 담배를 개발하였 고, Wright et al. (2005)은 ZFN-2 기술을 이용하여 형질전환 체에 도입된 표식유전자를 인위적으로 주입한 replace template 와 치환하였다. Cai et al. (2009)은 ZFN-3 기술을 이용하여 제 초제내성 유전자를 도입하였다. 다우애그로사이언스는 ZFN-3 기술(EXACTTM Precision Technology)을 이용하여 항영양 소의 일종인 phytate 저감 옥수수와 제초제저항성 옥수수 품종 을 개발하였다(Dow Agrosciences 2013, Shukla et al. 2009) TALENs은 Xanthomonas 균에 존재하는 Transcription activator-like effector (TALE)의 결합 domain과 nuclease (예, Fok I)를 조합한 heterodimer 복합체이다. TALE은 다수의 DNA 결합 domain (monomer)을 갖고 있는데, 각 domain은 34 개의 아미노산으로 구성되어있고 repeat variable diresidue (RVDs, 12번과 13번 아미노산)의 구성에 따라 특이적인 염 기를 인식하는(1 base/1 monomer) 구조이다. 즉, monomer 를 인위적으로 조합하면 monomer의 RVDs가 인식하는 염기 의 순서에 따른 target sequence가 결정되게 된다. 최근에는 monomer 배열(target sequence)을 편리하게 할 수 있는 toolbox 개념을 도입하고 있다(Sanjana et al. 2011). MN은 40여 개의 연속하는 염기서열을 인식하는 특이성과 DSB를 만드는 능력을 갖고 있어 genome editing에 유용하게 이용될 수 있고, Gao et al. (2010)은 MN을 이용하여 옥수수에서 돌 연변이를 성공적으로 유발하였다. MN 기술에 관해서는 Puchta & Fauser (2013)의 논문에서 리뷰된 바 있다. 최근에 CRISP /Cas-9 (Clustered Regulatory Interspaced Short Palindromic Repeats/CRISP-associated (Cas)) 기술이 새롭게 부각되고 있으며 human cell line (Mali et al. 2013), mouse, C. elegance (Zhao et al. 2014) 등에서 보고되고 있다. 위에서 언급한 SDN 기술들은 나름의 특색을 갖고 있으며 서로의 장단점을 비교한 논문들도 보고되고 있다(Wei et al. 2013).
Oligonucleotide Directed Mutagenesis
ODM은 목적하는 돌연변이를 포함하는 synthetic oligonucleotide를 세포에 주입하면 그와 상동위치 염색체 DNA와 hybridize하고 이때 mismatch된 결합을 하게 된다. 세포의 복구시스템에 의하여 mismatch된 부분이 복구되고 결과적으 로 oligonucleotide와 동일(돌연변이가 도입된)한 염기서열이 도입되게 된다. 미국의 Cibus사는 이 기술을 이용하여 제초제 내성 카놀라와 제초제내성 아마(flax)를 개발하여 상업화를 추진하고 있다(Cibus 2013).
Cisgenesis/Intragenesis
Cisgenesis/Intragenesis 기술은 상호 교배가 가능한(crosscompatible) 종에서 유래된 유전자를 도입하는 기술로서 선 발마커와 벡터백본 서열은 포함되지 않는다. Cisgenesis에서 유전자의 정의는 염색체상에 존재하는 완전한 구조(본래의 프로모터, 인트론 및 터미네이터와 순방향으로 연결)의 유전 자 발현시스템이 변형 없이 순방향으로 도입되는 것을 말한 다. Agrobacterium 공동배양으로 형질전환하는 경우에 Agrobacterium의 측면경계서열과 상동성이 높은 동종의 식물 DNA 염기서열을 식물의 측면경계서열로 활용하는 시도를 하고 있 다. Agrobacterium의 측면경계서열을 갖고 있는 cisgenesis 는 cisgenesis with T-DNA borders라 별칭하기도 한다 (EFSA 2012a). Intragenesis는 상호교배 가능한 유전자군 범 위 내에서 프로모터, 인트론, coding sequence와 터미네이터 를 순방향 또는 역방향으로 재조합하여 식물에 도입하는 경 우이다.
EFSA GMO Panel이 cisgenesis/intragenesis에 이용할 수 있는 ‘성적교잡이 가능한 생물(crossable - sexually compatable - organism) 유래의 유전자군(gene pool)’의 개념은 의외로 그 폭이 넓은 편이다. 보고서에 의하면 유전자군을 3개로 구 분하였는데, 유전자 1군은 자연적으로 쉽게 교잡이 가능한 경 우이다. 2군은 교잡이 어려우나 낮은 확률로 가임성 후대를 만들 수 있는 종 유래 유전자이다. 3군은 인위적인 기술을 이 용하여서만 교잡할 수 있는 종에게서 유래한 유전자군 이다. 이들 3군에 속하는 기술의 범위는 교량교배(bridge cross, 제3 자를 중간매개로 하여 서로 교배가 불가능한 두 종을 교배), 미숙배배양(배 회생기술), 체세포융합(원형질체융합), 전좌교 배(염색체 일부의 도입이 가능할 때 그 염색체에 존재하는 유 전자군) 및 체세포변이(somaclonal variation에 의한 돌연변 이체의 유전자군) 등이 있다(EFSA 2012a).
보고된 cisgenic 작물은 곰팡이 Phytophtora infestans 저 항성 감자(Haverkort et al. 2009)와 phytase 기능을 증진시 킨 barley (Holme et al. 2012) 등이 있다. 상업화를 목적으로 개발된 경우는 Simplot사의 intragenic 감자(Simplot 2013) 와 Wageningen대학의 Phytophtora infestans 저항성 cisgenic 감자(WUR 2013)가 있다.
Reverse Breeding
RB는 RNA interference를 이용하여 유용 형질을 갖고 있 는 선발된 heterozygous 개체의 meiotic recombination을 방 해하여 목적형질을 갖고 있는 배우자를 선발하여 반수체 식 물체로 만들고 순차적으로 상동이배체를 만드는 방법이다. Wijinker et al. (2012)은 애기장대에서 이 기술이 적용될 수 있음을 보고하였으며 잡종강세 특성을 갖는 hybrid seed의 형질을 고정하는 데 유용하게 활용될 수 있는 기술이다.
RNA directed DNA Methylation
RdDM은 RNA 단편을 매개로 하여 transcriptional gene silencing을 유도하는 epigenetics의 영역에 속하는 기술이다. 간단히 설명하면, 이중가닥 RNA로 전사될 수 있는 transgene 을 도입하면 만들어진 dsRNA가 short interfering RNAs (siRNAs)로 잘려지고 이 siRNA가 target gene의 프로모터 영역에 메틸화를 일으킨다. 결과적으로 downstream gene의 silencing을 일으키는데, 메틸화된 DNA는 후대로 유전되고 이러한 개체를 선발할 경우 염색체수준에서의 염기서열 변화 없이 유전자 기능이 변화된 식물을 얻게 된다. Cigan et al. (2005)은 가임성 유전자의 프로모터 메틸화를 통하여 웅성불 임 옥수수를 만든 예를 보고하였으나, 이 기술은 아직 연구단 계 수준이고 해결할 과제는 변화된 유전자 발현이 세대진전 과정에서도 안정하게 유지되도록 하는 것이다.
Grafting on GM-rootstock
Grafting on GM-rootstock 기술은 유용형질을 갖는 GM rootstock을 대목으로 활용하면 non-GM 접순(scion)은 대목 의 이득을 취하면서 GM산물의 영향이 없는 열매(또는 잎)을 수확할 수 있는 장점이 있기 때문에 과수작물 개량에 많이 이 용될 수 있는 기술이다. 이 기술로 개발된 형질전환 호두나무, 토마토, 자두나무 그리고 사과나무 등의 경우에서 transgenic rootstock에서 접순으로의 유전자(RNA, DNA, siRNA) 전이 여부에 대한 연구를 수행한 결과 도입유전자 유래의 mRNA 및 DNA의 이동현상은 관찰되지 않았다(Haroldsen et al. 2012, Nagel 2010, Smolka et al. 2010). 최근의 여러 연구에 서 RNA와 단백질이 대목 뿌리에서 다른 조직으로 이동한다 는 보고가 있으며, 위해성평가의 측면에서 외래유전자가 도입 된 GM식물과 GM대목을 이용하는 grafting이 서로 다르게 case-by-case로 고려되어야 하는 실례가 될 수 있다.
Agro-infiltration
Agro-infiltration은 재조합된 유전자를 Agrobacterium을 매개로 이용하여 특정 조직에 감염하여 단시간에 고농도의 유전자 발현을 볼 수 있는 시스템이다. 발현은 균이 접종된 조직에 한정되고 non-germ line 조직에 infiltration 시키면 발 현된 유전자가 후대에 전달되지 않는 특징을 갖고 있다. 이 기술은 종종 발현된 유전의 면역반응 진단 목적으로 이용되 기도 하는데 Gomez et al. (2013)은 담배에서 VP2 단백질을 발현시킨 예를 보고하였다.
NPBTs에 의하여 개발 중인 식물
현재 NPBTs 기술을 이용하여 개발 진행 중인 작물은 대부 분 개발 단계에 있기 때문에 공식적인 보고서나 논문은 없는 상황이지만 지난 2월 OECD워크숍에 보고된 내용을 간단히 정리하고자 한다. Cisgenesis를 이용한 작물은 scab 저항성 사과(스위스, 네덜란드), late blight 저항성 감자(네덜란드, 벨 기에, 아일랜드), 내건성 및 내냉성 옥수수(멕시코) 및 곰팡이 저항성 파파야(멕시코) 등이 있으며 intragenesis를 이용한 라 이그래스(오스트레일리아)가 있다.
ODM을 이용한 작물은 제초제내성 유채(영국)와 제초제내 성 아마(캐나다) 등이 있으며 SDN 기술을 이용하여 영국과 아일랜드에서 여러 가지 곡류 품종들을 개발하고 있다. 도입 유전자가 포함되지 않는 null-segregant를 선발하는 방법인 세대단축 육종을 이용하여 fireblight 내성 사과(스위스) 및 latent spherical virus 저항성 사과(일본) 등을 개발한 예가 있다. 한편, 웅성불임을 이용한 옥수수(아르헨티나)와 형질전 환체 rootstock을 이용한 Citrus 나무(아르헨티나), RNAi 기 술을 이용하여 리그닌 조성을 변형한 나무(벨기에) 및 Agroinfiltration을 이용한 여러 적용 사례(멕시코)가 있다. 미국의 경우, 구체적인 사례를 보고하지는 않았으나 NPBTs 기술과 신규식물의 규제관련 부서에 다양한 종류의 문의가 있었음을 보고하였다.
NPBTs로 개발된 식물의 환경위해성평가(ERA) 수행 사례 로는 아일랜드의 blight 저항성 cisgenic 감자, 네덜란드의 ODM 및 cisgenesis와 intragenesis를 이용한 식물과 나무들, 오스트 레일리아의 intragenic 라이그래스, 벨기에의 cisgenesis 및 RNAi 이용한 식물과 나무들 등이 있으며 대부분의 경우 위 해성과 관련된 특이한 사항이 없음을 보고하였다. 그리고 미 국, 멕시코, 인디아 등도 직간접적으로 환경위해성평가 경험 이 있음을 보고하였다.
NPBTs에 의하여 개발된 신규식물에 대한 non-GM 규정 적용 및 위해성평가 동향
상업화를 목적으로 개발된 모든 새로운 식물(new plant varieties)은 그것의 GMO 여부와 상관없이 규정된 절차에 따 른 농업특성평가, 환경적응성평가, 품종등록 및 재배허가 등 의 평가를 거쳐야 한다. 유전자재조합 기술로 개발한 유전자 변형식물의 안전성평가는 크게 도입유전자와 발현산물의 특 성평가, 의도적/비의도적 요인에 의한 환경위해성평가 및 식 품/사료로서의 안정성평가로 대별된다. 위해성평가 방법에 관 하여 다수의 국제기관/단체에서 가이드라인을 정하여 참고하 도록 하고 있으며 본질적으로 OECD, FAO 및 ILSI 등의 가 이드라인 기본 성격은 동일하다. 그러나 국가별로 조금씩 다 른 GMO 규제/법체계의 차이는 GMO 규제의 방향성 또는 지향점, 신규성과 규제유발요인(trigger)에 대한 개념, 개발방 법과 최종결과물에 대한 시각 및 국가 내의 규제/승인 관련 부서의 기능에 기인한다. 또한 경제, 문화, 정치 등의 비과학 적이며 복합적인 요인도 중요한 요소로 작용한다.
최근의 NPBTs 기술로 개발한 이른바 신규식물들이 GMO 인지 아닌지를 판정하는 문제와, 기존의 GM식물에 적용된 안전성평가에 관한 각종 평가방법의 타당성 문제도 중요한 논의의 대상이다. 또한, 이들 식물에서 유래된 신규식품 및 신 규사료의 위해성평가에 관한 논의도 촉발하게 되었고 NPBTs 기술에 의하여 생산된 식물의 경우, 사안에 따라 위해성평가 를 선별적으로(case-by-case) 수행하거나 간소화할 수 있는 방법에 대한 논의도 진행되고 있다.
유럽식품안전위원회(EFSA)는 산하에 작업반(EFSA GMO Panel)을 구성하고 cisgenesis, intragenesis 및 SDN-3에 의 하여 만들어진 식물에 대한 GMO 규제 적용 여부를 판단하 도록 요청한 바 있다. 이에 관한 EFSA GMO Panel의 판단 은 cisgenics와 SDN-1 및 SDN-2는 non-GMO의 규정을 적 용하고, intragenics와 SDN-3는 GMO에 준하는 규정을 적용 할 것을 제안하였다(EFSA 2012a, 2012b). Cisgenics의 경우 성적화합이 가능한 종에서 유래한 유전자가 본연의 프로모터 및 터미네이터와 구조적 변형 없이 연결된 상태로 도입되는 경우에는 환경과 인간의 건강에 미치는 위해성 정도가 전통 육종에 의한 식물과 다를 것이 없다는 판단에 기인하기 때문 이다. Intragenesis는 목적유전자가 다른 유전자(성적 교잡이 가능한 종에서 유래한 유전자)의 프로모터 및 터미네이터와 조합되거나, 인트론이 없는 coding sequence의 전체 또는 일 부분만 도입되거나 또는 역방향으로 도입될 수 있다. 이러한 경우는 잠재적 위해성 측면에서 종래의 형질전환식물과 비슷 하기 때문에 GMO와 동일한 규제가 적용되어야 한다는 논리 이다.
도입된 단백질복합체 또는 유전자가 존재하지 않는다는 전 제 하에서, 비교적 적은 수의 염기서열 indel(s)을 유발하는 SDN-1이나 단일염기 돌연변이가 도입되는 SDN-2 기술은 식물 염색체상에 자연적으로 일어나는 우연적인 돌연변이와 별로 차이가 없다고 인정한다. SDN-1의 경우 indel(s)에 의 한 돌연변이의 크기(염기의 수)에 대한 논란이 있으나 대체적 으로 22 bp 이내의 염기 수 변화는 용인하자는 경향이다. 물 론, 22개의 염기 수에 대한 논란도 있지만 돌연변이 허용치에 대한 명확한 범위를 정하기는 쉽지 않다. 비슷한 논리에서, ODM의 기술로 개발된 작물도 non-GMO로 인정할 수 있다 는 것이다. 원론적인 의미에서 도입유전자를 갖고 있는 heterozygous 세대의 후대분리 과정에서 선발된 목적기능을 보유한 null-segregant(도입유전자가 존재하지 않는)도 non- GMO로 인정될 수 있는 경우이다. 실제로 null-segregant를 선발하는 방법은 위에서 언급한 NPBTs 기술을 효율적으로 적용할 수 있는 중요한 수단이 될 수 있으며 이에 대한 GMO 규제 적용 여부는 결정되지 않았다. EFSA가 SDN-3에 GMO 규정을 적용하여야 한다고 결론을 내렸지만, GM식물 종류와 목적형질 등의 사안에 따라 적용되는 GMO 규제를 줄이거나 면제할 수 있을 것이라고 적시하고 있다.
이와 같이, 신규식물에 대한 GMO 규제 적용 여부는 도입 된 유전자의 구조, 도입유전자는 그의 또는 발현산물(단백질 또는 화합물)의 존재 유무 및 사용된 기술의 종류 등에 따라 case-by-case의 원칙에 의하여 결정되어야 한다는 것이 일반 적인 경향이다. 그러나 중요한 사실은 신규식물에 대한 GMO 규제의 적용 여부는 각국의 고유한 권리이고, 이는 과학 외적 인 정치, 경제, 문화적 영향을 많이 받기도 한다. 실제로 미국 과 캐나다는 자국의 GMO 관련 규정에 NPBTs라는 용어를 사용하지 않고 있으며 캐나다의 경우에는 사용된 기술보다는 최종결과 산물에 기준점을 두고 판단하는 시스템이다(Health Canada, 2006). 캐나다의 가이드라인에 의하면 새로운 형질 (new trait)이 존재하는 식물은 신규식물로 취급되고 위해성 평가의 대상(GMO는 신규식물의 범위에 해당됨)이 되며 그 최종 결과물이 전통육종에 의한 식물과 얼마나 다른가에 판 단의 근거를 두고 있다.
미국은 GM식물에 대한 별도의 위해성평가 규정은 없으며 전통적인 육종에 의하여 개발된 식물과 동일한 규제 적용을 받는다(FDA, 1992). 미국의 재조합유전자 변형작물(recombinant DNA modified crops)의 위해성평가는 일반적인 새품 종(new plant variety)의 경우와 같이 1) 숙주 식물의 특성, 2) 유전자 제공자의 특성, 3) 유전적 변화, 4) 새로 도입된 물질 의 특성과 기능 및 5) 유전적 변화에 따른 비의도적 영향에 관하여 수행된다. 특히, USDA의 경우 사용된 기술의 종류와 는 별개로 그 과정에서 병원성을 유발하는 인자(예, 병원성 미생물)가 개입되면 GM/non-GM 여부와 관계없이 엄격한 위해성평가를 거쳐야 한다. 예를 들면, 똑같이 완벽하게 무결 점인 cisgenics 식물일지라도 제작과정에서 Agrobacteium이 이용되면 유전자총이 사용된 경우보다 더 엄격한 위해성평가 를 받아야 한다는 사실이다.
비교분석의 개념에 의한 신규식물의 위해성평가
새로운 식물에 대한 위해성평가에서 고려되는 가장 중요한 개념은 신규식물(GMO를 포함한 새로운 품종)과 전통적인 재배종(또는 야생종) 대조구(conventional counterpart 또는 non-GM comparator)의 상호 비교분석(comparative analysis) 이다. OECD는 비교분석은 GM작물 또는 GMO 유래의 식품 의 안전성을 결정하는 데 있어 가장 실제적인 방법은 이들이 유 사한 종류의 식품(들)과 실질적동등성(substantially equivalent) 이 있는지를 분석하는 것이라고 밝혔다(OECD 1993). 실질 적동등성은 안전성평가 방법 그 자체는 아니지만 신규식품과 기존의 전통적인 것을 상호 비교하여 의도적 또는 비의도적 차이를 규명함으로써 안전성평가의 시작점을 제공하는 것이 다(EFSA 2011). 실제적으로 이는 식물의 개발과정보다는 결 과를 중시하는 개념으로서, 식물의 최종산물의 구성요소 분석 (composition analysis)을 중요한 평가근거로 활용한다. 즉, 개발된 신규식물의 구성성분(단백질, 지질, 탄수화물, 무기물, 2차대사산물, 영양성분과 항영양성분 등)과 알려진(또는 잠재 적인) 위해 요소들을 전통적인 육종에 의하여 개발된 재배종 및 자연에 존재하는 야생종과 비교 분석하여 그의 동등성(또 는 차별성)을 비교하는 것이다.
비교분석 방법들 중에서 인류와의 친숙성(familiarity or history of safe use)과 식품으로 안전하게 이용된 역사(history of safe use as food)의 개념이 매우 중요하다. 현재 인체 또 는 동물에서의 안전성을 판단하는 중요한 잣대로 활용되며 특히, 안전성의 과학적 증명이 어려운 부분에서 논리적(합리 적) 유추를 할 수 있는 근거로 활용된다. 인류와의 친숙성 개 념은 GM식물의 위해성(환경위해성)평가는 생물학적 특성이 잘 알려져 있거나 이용 경험이 있는 적합한 대조군(comparator, 대 개의 경우 전통육종으로 개발된 재배종)과의 비교를 통하여 이루어져야 한다는 의미이다. 즉, GM식물이 환경에 방출(노 출)될 경우 환경에 미치는 영향이 대조식물과 비교할 때 차이 가 있는지 유무를 판단하고 그 차이가 얼마나 큰 영향을 미치 는가를 판단하는 것이다. 아울러 식품으로서 안전하게 이용 된 역사를 고려하여야 한다는 개념은 노출량평가(exposure assessment)와 직접 연관이 있다. 이는 사람 또는 동물이 GM 식물 유래의 잠재적 위해성물질에 노출되는 양과 빈도를 평 가하고 사람이나 동물에 위해를 미칠 수 있는 최소 노출량을 산정하여 평가에 활용하려는 개념이다. 고려되는 위해성 요소 는 독성물질, 알레르기성 및 항영양성분 등이 있다. 또한 인류 가 일상생활에서 이들 잠재적 위해 물질을 얼마나 자주, 많이 접촉하였는지도 중요한 평가 기준점이 된다.
사실, 현재의 각국의 GMO 안전성평가는 이러한 비교분석 에 의한 실질적 동등성의 개념을 적용하고 있으며 많은 경우 에, 안전성평가 결과에 “as safe as”, “as nutritionally valuable as” 또는 “unlikely to have adverse effects on” 등의 문구가 사용됨을 볼 수 있다. 이는 안전성평가가 현재의 과학기술 수 준으로 접근할 수 있는 방법을 이용하고 도출된 결과를 지금 까지 밝혀진 학문적 논리에 근거하여 설명(즉, 지식의 한계범 위 내에서)하여야 하기 때문이기도 하다. 이에 근거하여 NPBTs 기술로 만들어진 신규식물의 위해성평가도 실질적동등성의 개념 안에서 다루어져야 한다는 것이 일반적인 경향이다.
국제사회에서 이들 신기술로 개발된 신규식물에 관한 안전 성평가에 대한 다양한 회의와 학회 등이 진행되고 있다. 대체 적인 국외의 경향은 SDN, ODM, cisgenesis 등과 도입유전 자가 존재하지 않는 null-segregants에 대하여 non-GM으로 규정하거나 상황(case-by-case)에 따라 유연하게 GMO 규정 을 적용한다는 입장이다. 현실적으로 이들 신규식물과 전통적 인 재배종을 과학기술적으로 구별할 수 없고, 실질적동등성 측면과 안전성 측면에서 문제가 없다면 이들 신규식물에 GMO 관련 규제를 적용할 근거가 약해지는 것이다.
한국의 NPBTs 기술은 학문적 연구와 실용화를 위한 기술 축적 단계로 판단되며 2013년 한국에서도 NPBTs 기술에 대 한 워크숍/공청회를 진행한 바 있다. 현재 국내 규정은 유전 자변형작물 개발 초기 단계(온실 및 환경방출)부터 GMO 관 련 규제 적용을 받기 때문에 이들 NPBTs 기술에 의한 신규 식물은 GMO로 분류될 수 있다고 판단된다. 현실적인 의미에 서 국내의 관련 학계에서 NPBTs 기술과 그에 의하여 만들어 진 식물에 대한 위해성평가의 방향성을 결정하기는 어려운 듯하다. 가장 큰 이유는 아직 이러한 기술을 적용하여 개발한 식물을 대상으로 환경위해성평가와 식품안전성평가를 수행한 경험이 없기 때문이라고 생각된다.
식물형질전환 분야에서의 한국의 기술 수준은 선진국과 비교 하여 뒤떨어지지 않으며 유전자재조합 DNA를 식물체에 도입 하기 위한 Agrobacterium 형질전환과 particle bombardment 등의 기술은 이미 오래 전에 일상화되었다. 이와 관련된 취약 점은 유전자발현 시스템에 필요한 국내 개발된 프로모터/터미 네이터와 선발마커/표지인자로 이용할 유전자가 부족한 점이 다. 그러나 원형질체융합, 약(배)배양, grafting, 영양체번식, 돌연변이 기술 등은 오히려 우리의 강점이 된다고 여겨지고 최근 많은 발전을 이루고 있는 나노테크놀로지와 생물정보학 분야는 우리의 단점을 극복하는 데 활용될 수 있는 새로운 개 척분야이다. 예를 들면, 최근 진행되고 있는 다부처유전체사 업을 통하여 확보되는 방대한 유전자서열 정보와 생물정보 기술을 이용하여 SDN, ODM 및 cisgenesis에 필요한 유전자 정보를 확보하고 식물 측면경계서열(일명 P-DNA) 개발에 활 용할 수 있을 것이다. 또한, 나노입자를 수송체로 이용하여 재 조합유전자 또는 단백질복합체를 세포 내로 도입하는 데 활 용할 수 있을 것이고, 이는 기존의 Agrobacterium과 유전자 총 기술을 대체하는 수단이 될 수 있다. 원형질체융합, 배배양 및 돌연변이육종 기술 등은 새로운 종(품종)의 개발뿐만 아니 라 cisgenesis에 필요한 도입유전자의 gene pool을 극대화하 는 데 이용할 수 있다. 또한 전통적인 grafting 기술을 이용하 여 GM rootstock에 접순을 붙이는 기술은 GMO의 안전성논 란을 우회하는 기술로 활용될 수 있고, 교배육종 기술은 세대 단축과 null-segregant 선발 등에 활용될 수 있다. 이와 같이, 우리가 의도하지는 않았지만 NPBTs 기술을 이용하여 새로운 식물을 개발하기 위한 준비가 의외로 잘되어 있다고 판단된다.
풀어야 할 문제는 새로운 품종(GMO를 포함하여)의 안전 성평가에 대한 국제적인 흐름을 파악하고 그에 따른 사고의 전환과 능동적인 대처가 필요한 점이다. 즉, 이 시점에서 NPBTs 기술의 발달과 이를 이용한 신규식물의 안전성평가의 방향에 대하여 국제사회에서 이슈화되는 이유와 그 숨겨진 이면을 정확히 들여다볼 필요가 있다. 국내의 농업환경에서 GMO 개발과 재배에 따른 경제적 실리는 크지 않을 전망이 나 주요 식량생산국의 GMO 재배면적의 점진적 증가추세와 국내에 수입되는 곡물의 절대량을 GMO가 차지하고 있는 현 실을 직시하여야 한다. 또한 국가적인 대계에서 종자주권과 식량안보를 위하여 다국적기업에서 개발한 GMO와 대등한 경쟁력을 갖는 GM작물 개발을 간과할 수 없는 동시에 GMO 에 대한 거부감이 강한 보편적 국민정서를 고려하여야 하는 상황이다. 그러므로 GMO에 대한 논란을 회피 또는 저감할 수 있는 NPBTs기술의 장점과 우리 과학기술 분야의 장점을 살려서 안전성 논란을 우회할 수 있는 새로운 작물개발 전략 을 세우고 실행하여야 한다고 생각된다.
기존의 유전자변형식물은 외래의 도입유전자를 갖고 있으 며 이들로부터 기인한 단백질 또는 합성물질에 의한 의도적/ 비의도적 영향에 대한 안전성 논란이 사회적 이슈가 되어 왔 다. 최근의 기술적 진보에 의하여 이른바 식물육종의 신기술 이 발달하게 되었고 이들 기술로 만든 신규식물에 대한 안전 성평가에 GMO 관련 규제의 적용 여부 문제가 대두되게 되 었다. 이들 NPBTs 기술로 만든 신규식물의 특징은 SDN이나 ODM과 같이 염색체상의 정확한 위치에 짧은 염기서열의 indel(s)이나 단일염기 돌연변이를 도입하여 자연적인 돌연변 이와의 구별이 거의 불가능하거나, cisgenesis와 같이 성적교 잡이 가능한 종 유래의 유전자를 구조변형 없이 도입하여 근 연종과 동질적인 식물을 만들거나, heterozygous 형질전환체 후대세대의 null-segregant 선발이나 epigenetic를 이용하여 도입유전자가 존재하지 않지만 목적 형질을 갖는 식물체를 만드는 장점이 있다. 또한 grafting이나 Agro-infiltration 등 의 방법으로 안전성평가를 회피하거나 경감할 수 있는 가능 성을 높이게 되었다. OECD를 비롯한 주요 GMO 개발국의 관련 학회에서는 SDN, ODM 및 cisgenesis 또는 intragenesis 기술로 만든 식물에 대하여 non-GM 식물과 동일한 위해성평 가 규정을 적용하거나 상황에 따라 완화된 규정을 적용할 수 있다고 판단하고 있다. 현 시점에서 이들 NPBTs 기술을 이 용하여 개발된 식물이 상업화된 예는 없으나 많은 국가에서 상업화를 목적으로 개발 중이며 일부에서는 안전성평가를 완 료한 단계이다. 이러한 현실에서 NPBTs 기술의 개념 정립, 신규식물의 안전성평가의 방향 설정 및 현실성 있는 작물개 발 방안을 마련하여야 한다. 이를 통하여 GMO에 대한 안전 성 논란과 사회적 거부감을 우회하는 동시에 답보 상태에 있 는 분자육종 분야의 발전을 도모할 계기를 마련하여야 한다.
본 논문은 농촌진흥청 국립농업과학원의 어젠다사업 과제 PJ008545와 PH009652의 공동지원에 의하여 이루어진 것이다.
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Novel Plant Breeding Techniques and Risk Assessment
Korean. J. Breed. Sci.. 2014;46(4):333-341.   Published online December 31, 2014
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